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产品基本信息
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产品名称 |
Applied CellTM 人间质干细胞诱导成软骨分化试剂盒 |
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货 号 |
AC-1001028 |
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规 格 |
1kit |
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保存条件 |
基础培养基2-8℃，添加剂-20--80℃保存； 混合后2-8℃保存，3周内使用完毕 |
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使用范围 |
人间质干细胞诱导分化成软骨 |
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保质期 |
1年 |
产品简介
人间质干细胞诱导成软骨分化试剂盒是埃泽思生物（Applied CellTM）的一款用于人类间质干细胞诱导分化成软骨的试剂盒，可用于骨髓、脐带、脂肪等组织来源的间充质干细胞的诱导成软骨分化。本产品于科学研究，不能用于临床诊断、治疗，以及其他用途。
产品特性
l 诱导分化程序简单便捷。
l 诱导成软骨细胞效率高。
产品内容
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试剂 |
规格 |
数量 |
运输 |
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人间质干细胞诱导成软骨分化基础培养基
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87mL |
1 瓶 |
冰袋 |
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人间质干细胞诱导成软骨分化添加剂I
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11mL |
1瓶 |
干冰 |
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人间质干细胞诱导成软骨分化添加剂II |
2mL |
1管 |
干冰 |
操作方法
1. 相关材料
• Xeno-Free人间质干细胞培养基（Applied Cell™:AC-1001003）
• 人间质干细胞诱导成软骨分化试剂盒（Applied Cell™:AC-1001028）
• 成软骨检测染液（Applied Cell™:AC-1001023）
• 细胞固定液
• Xeno-Free细胞消化液（Applied Cell™:AC-1001024/1001025）
• 磷酸盐缓冲液(1×PBS) （Applied Cell™: Cat.AC-1001037）
2. 实验准备
人间质干细胞诱导成软骨分化培养基的配制：
2.1 在2-8℃解冻人间质干细胞诱导成软骨分化添加剂I、II，轻晃摇匀；
2.2 随后将添加剂依次加入到人间质干细胞诱导成软骨分化基础培养基中（2种添加剂共13mL与87mL基础培养基彻底混合）混匀，即为人间充质干细胞诱导成软骨分化培养基。人间充质干细胞诱导成软骨分化培养基可在2-8℃稳定储存2-3周。
注意：人间质干细胞诱导成软骨分化添加剂只能在2-8℃解冻，待添加剂加入到培养基以后，请用培养基润洗添加剂试管1-2次，因添加剂量较少可防止添加剂粘附在试管壁上造成损失。
3. 实验操作
3.1诱导成软骨球
3.1.1 诱导成软骨分化实验之前，用Xeno-Free细胞消化液消化后计数；
3.1.2 分配0.5 mL细胞悬液（2-3×105个细胞）到15mL离心管中，300×g，离心5min；
3.1.3 吸掉上清，用1mL人间质干细胞诱导成软骨分化培养基重悬沉淀，300×g，离心5min。
3.1.4 离心后拧松离心管盖便于气体交换。置于37℃，5%CO2培养箱中培养。第二天，细胞
注意：离心后不需要吸掉上清液，且不要随意晃动离心管。
3.1.5 自接种时间开始计算，每隔1-2天更换人间质干细胞诱导成软骨分化培养基；
注意：每次换液时，轻轻的摇动离心管或轻弹离心管底部确保细胞球没有粘附到管
壁上。
3.1.6 15-21天，软骨球停止生长，收获软骨球：吸掉人间质干细胞诱导成软骨分化培养基，用PBS洗1次。
3.2 成软骨检测染液染色
3.2.1 清洗：软骨球用PBS清洗2次；
3.2.2 固定：加2mL细胞固定液，固定30min，水洗2次；
3.2.3 染色：成软骨检测染液（Applied Cell™:AC-1001023）染色5min；
3.2.4 洗涤：dH2O洗去多余的染料，软骨球呈深蓝色。